オルガノイド培養用　Afamin/Wnt3a CM

Wntシグナルは初期発生や幹細胞の維持と再生、がん化に関与していることが知られており、これらの増殖・維持に重要な役割を果たしています。特にWnt3aは腸管上皮細胞におけるLgr5陽性幹細胞の増殖維持に必須のニッチ成分であることが明らかとなり、小腸、大腸、胃、膵臓、肝臓など様々な消化管オルガノイドの作製に使用されています。

Wnt3aは、従来より消化管オルガノイドの培養に利用されていましたが、脂溶性タンパク質であるため無血清培養液中で凝集体を形成し、十分に活性を発揮できないことが課題でした。
Miharaらは、血清の構成成分の一つであるAfaminがWnt3aと複合体を形成することにより、高いWnt3a活性が維持できることを見出しました（PMID: 26902720）。また、 AfaminとWnt3aの複合体をオルガノイドの培養に使用することにより、オルガノイドの長期培養が可能となりました。

Afamin/Wnt3aコンプレックスの概要図

Afamin/Wnt3aコンプレックスの安定性

Mihara, et al, eLife (2016) [PMID: 26902720]

Wnt3a CM（Wnt3a単独発現培地）、Wnt3a精製品およびAfamin/Wnt3a CM（Afamin/Wnt3a共発現培地）存在下で消化管オルガノイドを長期培養しました。
Afamin/Wnt3a CM存在下では、18日間の長期培養でもオルガノイドが維持できました。


Mihara, et al, eLife (2016) [PMID: 26902720]

Afamin/Wnt3a CM及び他社製品の組換えWnt3a存在下で、Lgr5プロモーターの制御下にtdTomatoを発現するオルガノイド株を培養しました。Afamin/Wnt3a CM存在下での培養では、高いレベルでLGR5陽性細胞を維持していることが確認できました。

出典：慶應義塾大学医学部坂口光洋記念講座（オルガノイド医学）佐藤俊朗教授との共同研究成果より

	Afamin/Wnt3a CM	Purified Wnt3a	Wnt3a conditioned medium prepared in lab
Wnt3a活性	Afaminによって安定化された 高いWnt3a活性	培養液中で凝集体を形成するため 不十分なWnt3a活性	血清で安定化された 高いWnt3a活性
品質評価	Wnt3aシグナル活性評価	多くはタンパク質定量 Wnt3a活性にLot間差がある場合もある	各研究室で調製されており、 発現量・活性ともに未確認
血清の有無	無血清	無血清	血清入り 血清由来成分がオルガノイド培養に 影響を与える恐れあり

Afamin/Wnt3a CMはAfaminとWnt3aタンパク質を無血清培地中に共発現させたConditioned Mediumであり、無血清培地中で高いWnt3a活性が期待できます。

Code No.	品名	主要成分	包装形態	溶媒	保存期間
J-ORMW301R	Afamin/Wnt3a CM	Mouse Wnt3a Human Afamin	10 mL	Advanced D-MEM/F-12	ラベルに記載