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抗原特異的CTLの誘導とInfluenzaテトラマーを用いた染色例


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Mouse class I Tetramer使用例

■ In vitro stimulationによる抗原特異的マウスCTLの誘導（インフルエンザウィルス）
マウスモデルにおけるインフルエンザウィルスエピトープとそのバリアントの報告は多く、MHCの構造解析や結合力の研究から、ワクチン開発やCTLクローンを用いた免疫応答の研究など、さまざまな目的に使用されています。ペプチド免疫でのCTL誘導を行う際にも、CTLの誘導が効率良く行えるため、ペプチド免疫によるCTL誘導に最適な抗原のひとつといえます。in vitroにおけるCTL誘導データと、取り扱っておりますマウスインフルエンザテトラマーの情報を一覧にまとめました。


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染色例：H-2Db Influenza NP Tetramer-PE（Code No. TS-M502-1）

H-2Db拘束性Influenza NP由来の抗原ペプチド（ASNENMDTM, Code No. TS-M502-P（販売終了））と、ヘルパー作用の報告がある抗原ペプチドI-Ab HBc helper peptide（Code No. TS-M701-P）を混合し、免疫賦活剤とエマルジョン化し、C57BL/6マウスに腹腔免疫しました。11日後に脾臓を摘出し、脾細胞を調製後、一部をサンプリングしてMHC Tetramer試薬を用いて染色しました（day 0）。これらの脾細胞は、in vitroにおいてInfluenza NP由来の抗原ペプチド（1 μg/mL）で1週間刺激培養しました。これを同様にMHC Tetramer試薬を用いて染色しました（day 7）。
ドットブロット展開図右上の数字は、CD8陽性細胞中のテトラマー陽性細胞率（%）を示します。FSC/SSC展開図にてリンパ球領域をR1とし、7-AAD陰性細胞領域をR2としました。このR1かつR2領域にて解析を行いました。
Influenza NP由来の抗原ペプチド（ASNENMDTM）を免疫したマウスにおいて、in vitro stimulationにより1.3～12.7％のInfluenza NP特異的CTLの誘導が確認されました。Negative Tetramer（H-2Db human gp100 Tetramer-KVPRNQDWL-PE, Code No. TS-M505-1）を用いた比較染色により、Influenza NP特異的CTLであることが明確に示されました。
※各エピトープにおける誘導条件は、各試薬のデータシートをご覧ください。